可的松檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) ELISA操作孵育過程常見問題及解答: 1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。 3)孵育溫度未按照說明書要求進行,溫度過高或過低; 解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說明步驟嚴格控制操作時間和孵育溫度。 通用名稱:可的松檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 英文名稱:Cortisol ELISA 產(chǎn)品貨號:EIA1887 產(chǎn)品規(guī)格:96T 檢測樣本:血清和血漿 公司品牌:德國DRG 儲存條件:2-8℃ 檢測方法:ELISA方法 預(yù)期用途:可用于人血清和血漿中可的松的定量檢測 參考價格:詢價 供應(yīng)商家:深圳市科潤達生物工程有限公司
可的松檢測試劑盒預(yù)期用途 可的松檢測試劑盒用于人血清、血漿中可的松含量的定量檢測。
可的松前言簡介 皮質(zhì)醇(氫huà可的松,復(fù)合物F)是人體中一種主要的糖皮質(zhì)激素,它是由腎上腺皮質(zhì)的束狀帶產(chǎn)生的。90%的循環(huán)皮質(zhì)醇會結(jié)合到皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBG,皮質(zhì)激素傳遞蛋白)上,7%的循環(huán)皮質(zhì)醇會結(jié)合到白蛋白上,僅1-3%的循環(huán)皮質(zhì)醇是以游離狀態(tài)存在。僅僅游離狀態(tài)的皮質(zhì)醇才具有活性。游離皮質(zhì)醇釋放到唾液中,并作為皮質(zhì)醇的一小部分代謝產(chǎn)物從腎臟排出。血液中游離皮質(zhì)醇的水平可以以負反饋的形式通過下丘腦分泌的CRH(促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素)和垂體分泌的ACTH(促腎上腺皮質(zhì)激素)來調(diào)節(jié)皮質(zhì)醇的分泌,但皮質(zhì)醇的水平也會受各種因素的影響。人體內(nèi)的皮質(zhì)醇有一個生理波動,在早晨達到峰值,在夜間則降至低水平。血漿皮質(zhì)醇的這種起伏波動在唾液中可表現(xiàn)為:在人醒后的90分鐘內(nèi)達峰值。糖皮質(zhì)激素分泌不正常的疾病可通過皮質(zhì)醇的檢測表現(xiàn)出來,如:庫欣綜合征和阿森氏疾病。因為皮質(zhì)醇水平存在著日變化,所以在做個體皮質(zhì)醇篩查或動力學(xué)實驗(如地塞米松抑制實驗或ACTH刺激實驗)時應(yīng)多采集幾個時段的樣品。唾液樣品的采集是一個簡單的采樣方法,不需要方法靜脈穿刺取樣。孕婦、甲狀腺功能低下、腎病綜合征、明顯肥胖和接受了不同藥物治療(包括口服bì孕藥)患者的CBG水平可能會不正常,所以建議檢測其唾液皮質(zhì)醇。 可的松檢測試劑盒檢測原理 可的松ELISA試劑盒是基于競爭法的酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒。微孔板中包被有抗可的松特異性單克隆抗體,樣品中的可的松與HRP綁定的可的松競爭。洗板后,加入底物液孵育,之后再加入終止液。所綁定的過氧化物酶的量與樣品中的可的松濃度成反比。 可的松檢測試劑盒組成成分 ●微孔板——12×8包被有抗可的松抗體 ●標準品(SD 0-6)——7×1ml ●濃度0、20、50、100、200、400、800ng/ml ●換算0, 55.2, 138, 276, 552, 1104, 2208 nmol/L ●換算系數(shù)——1 ng/mL = 2.76 nmol/l——含0.3%Proclin 作為防腐劑 ●酶聯(lián)物——1×25ml——即用型 含HRP結(jié)合的可的松 ●底物液——1×14ml——即用型 含TMB ●終止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸 ●洗滌液——1×30ml——40倍濃縮
可的松檢測試劑盒檢測方法 ●洗液稀釋 ●30ml+1170ml蒸餾水 混勻 ●室溫下2周穩(wěn)定 ●檢測開始前將試劑盒所有組分穩(wěn)定至室溫 可的松檢測試劑盒儲存條件 可的松ELISA試劑盒保存在2-8℃下,效期內(nèi)有效。
可的松檢測試劑盒檢測步驟 ●加入20ul標準品、質(zhì)控品、樣品到各自的孔 ●每孔加200ul酶聯(lián)物,混勻 ●室溫下孵育60分鐘(不用蓋板) ●倒出孔內(nèi)液體,用洗液3×400ul洗滌 ●加入100ul底物液 ●室溫下孵育15分鐘 ●每孔加入100ul終止液 ●450nm下讀取吸光值,不超過加入終止液后的10分鐘
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