http://www.kerunda。。com.cn/part3/7.html PCR 芯片定義 實(shí)時(shí)定量 PCR 是檢測基因表達(dá)zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗(yàn)過程中,實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光染料的信號(hào)變化,反映樣品中的基因拷貝數(shù)。實(shí)時(shí)定量 PCR 線性范圍廣(能達(dá)到 5 個(gè)數(shù)量級(jí)),因此可以檢測同一樣品中表達(dá)量極低的基因和表達(dá)量很高的基因。但是,由于實(shí)時(shí)定量 PCR 需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線和同時(shí)分析內(nèi)參基因,因此,每次實(shí)驗(yàn)只能檢測少數(shù)幾個(gè)基因的表達(dá)水平,若要檢測大量基因,則工作量巨大,耗時(shí)長久。 通過簡單的,經(jīng)過優(yōu)化的實(shí)時(shí)定量 PCR 體系,如 SuperArray 的 RT 2 Profiler TM PCR 芯片,研究者可以同時(shí)研究大量基因,既可以進(jìn)行某些特別感興趣的信號(hào)通路的研究,也可以作為驗(yàn)證芯片結(jié)果的方法。 為了獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果, PCR 芯片面臨以下挑戰(zhàn):高特異性,高靈敏度和可重復(fù)性。高靈敏度或低檢出限,在樣品的總 RNA 量少,基因表達(dá)量低的情況下,也能檢測出目的基因。高特異性,擴(kuò)增產(chǎn)物嚴(yán)格保證基因特異性,避免非特異性產(chǎn)物,如引物二聚體的產(chǎn)生??芍貜?fù)性,通過標(biāo)準(zhǔn)化的反應(yīng)體系和實(shí)驗(yàn)方法,使得多人多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)均能獲得可靠的基因定量結(jié)果。 PCR array 輔助試劑 1 RT2 First Strand Kit Catalog Number | Product Description | | C-08 | For 96 samples | C-09 | Fast Handling for First Strand cDNA Synthesis | | C-03 | Reagents for Twelve (12) First Strand cDNA Synthesis Reactions, 20 μl each | |
2 RT2 qPCR Master Mixes 根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)不同的儀器類型選擇相應(yīng)的 Max mixes RT 2 SYBR Green/ ROX: For all ABI Instrumentation | Cat. No. | Size | PA-012 PA-012-12 PA-012-24 PA-012-8 PA-112 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl reactions (2.5 ml) For 12 RT2 Profiler? PCR Arrays For 24 RT2 Profiler? PCR Arrays For 4 pack of 384-well PCR Arrays 2000 25-μl reactions (25 ml) | RT 2 SYBR Green/ Fluorescein: For all BioRad Instrumentation | Cat. No. | Size | PA-011 PA-011-12 PA-011-24 PA-011-8 PA-111 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl For 12 RT2 Profiler? PCR Arrays For 24 RT2 Profiler? PCR Arrays For 4 pack of 384-well PCR Arrays 2000 25-μl reactions (25 ml) | RT 2 SYBR Green: For instrumentation not requiring reference dye | Cat. No. | Size | PA-010 PA-010-12 PA-010-24 PA-010-8 PA-110 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl For 12 RT2 Profiler? PCR Arrays For 24 RT2 Profiler? PCR Arrays For 4 pack of 384-well PCR Arrays 2000 25-μl reactions (25 ml) |
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