人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）酶免試驗(yàn)
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）產(chǎn)品詳細(xì) | 中文名稱 | 人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x） | | 英文名稱 | Human amyloid β (Aβ) (1-x) | | 產(chǎn)品貨號(hào) | 27729 | | 產(chǎn)品規(guī)格 | 96T | | 檢測樣本 | EDTA-血漿，腦脊髓液，血清，細(xì)胞上清或腦組織提取液 | | 適應(yīng)物種 | 人 | | 預(yù)期用途 | 用于EDTA-血漿，腦脊髓液，血清，細(xì)胞上清或腦組織提取液中人Aβ(1-x)的定量檢測 | | 產(chǎn)品品牌 | 日本IBL | | 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）實(shí)驗(yàn)原理
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）是一種夾心法的ELISA試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑，終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中Aβ(1-40)的量成正比。
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）檢測范圍
7.81~500pg/mL（1.8~115.5pmol/L，Aβ(1-40)分子量為4331）
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）試劑盒預(yù)期用途
僅供研究使用，不能用于診斷，此試劑盒用于EDTA-血漿，腦脊髓液，血清，細(xì)胞上清或腦組織提取液中人Aβ(1-x)的定量檢測，血清中的Aβ(1-x)非常不穩(wěn)定，檢測值會(huì)不會(huì)減少則取決于保存條件，如果上清樣品中含有胎牛血清（FCS），那么FCS內(nèi)的Aβ(1-x)可能會(huì)被檢測到，建議設(shè)置一陰性質(zhì)控，天然和重組的人Aβ(1-x)都可用此試劑盒檢測。
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）試劑盒組成成分
1.微孔板，96T，包被有抗人Aβ(N)(82E1)小鼠IgG單抗
2.標(biāo)記抗體濃縮，30X，0.4ml，HRP標(biāo)記的抗人Aβ(11-28)小鼠IgG 單抗
3.標(biāo)準(zhǔn)品，0.5ml，2支，人Aβ(1-40)
4.EIA緩沖液，30ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
5.標(biāo)記抗體稀釋液，12ml，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS
6.著色劑，TMB，15ml
7.終止液，1N硫酸，12ml
8.洗滌緩沖濃縮液，40X，50ml，0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）試驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
■酶標(biāo)儀（450nm）
■移液器和槍頭
■有刻度的燒杯和量筒
■蒸餾水
■冰箱（4℃）
■坐標(biāo)紙（對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)）
■吸水紙
■標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管
■洗瓶
■一次性試驗(yàn)管
人淀粉樣蛋白β（Aβ）（1-x）實(shí)驗(yàn)步驟
使用前，所有樣品應(yīng)平衡至室溫，大約30min，然后充分混勻，確保試劑質(zhì)量無變化，標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測同時(shí)進(jìn)行
| 試劑 | 檢測樣品 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 檢測樣品對(duì)照孔 | 試劑對(duì)照孔 | 檢測樣品
100ul | 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品（1-7管）100ul | EIA緩沖液（第8管） 100ul | EIA緩沖液100ul | | 蓋板，4℃下溫育過夜 | | 洗板7次 | | 酶標(biāo)抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | - | | 蓋板，4℃下溫育60min | | 洗板9次 | | 顯色劑 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | | 室溫避光溫育30min | | 終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | | 加終止液后30min內(nèi)450nm處讀取OD值 |
1.確定好空白對(duì)照孔，并在相應(yīng)的微孔中加入100ul EIA緩沖液。
2.確定好樣品對(duì)照孔，檢測樣品孔和標(biāo)準(zhǔn)品孔，然后分別將100ul樣品對(duì)照品、檢測樣品和稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品加入到相應(yīng)的微孔中。
3.蓋板，4℃下溫育過夜
4.用洗滌瓶洗板，在微孔中加入洗滌液浸泡15-30秒，棄去洗滌液。重復(fù)7次，后在吸水紙上拍干。如果是用洗板機(jī)洗板時(shí)，用洗板機(jī)洗四次后，再用洗滌瓶洗3次。
5.每孔加100ul酶標(biāo)抗體，除試劑空白對(duì)照孔外
6.蓋板，4℃下溫育60min
7.按照步驟4）洗板9次
8.將所需量的顯色劑加入到試管中，然后在每一微孔中加入100ul顯色劑。為了避免污染，請(qǐng)勿將剩余試劑在倒入原裝試劑瓶中。
9.室溫避光溫育30min，加入顯色劑后溶液顏色會(huì)變成藍(lán)色
10.在每孔加100ul終止液，此時(shí)溶液顏色會(huì)變成黃色
11.擦去微孔板底部的污點(diǎn)或水滴，終止液加入后30min內(nèi)，在酶標(biāo)儀450nm處讀數(shù)
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