鐵調(diào)素檢測試劑
通用名稱：鐵調(diào)素-25檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Hepcidin 25 bioactive ELISA
產(chǎn)品規(guī)格：96T
產(chǎn)品貨號：EIA 5258
產(chǎn)品品牌：德國DRG
檢測方法：ELISA
供應(yīng)商家：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司
預(yù)期用途
鐵調(diào)素檢測試劑可用于血清、肝素血漿中鐵調(diào)素-25的體外定量檢測（僅用于科研使用。）
鐵調(diào)素介紹
鐵調(diào)素是人體內(nèi)的一種鐵平衡調(diào)節(jié)多肽?；钚远嚯蔫F調(diào)素-25主要是在肝臟中產(chǎn)生，通過蛋白質(zhì)溶解切割前鐵調(diào)素的C-端的25個氨基酸所產(chǎn)生的。隨后，N-端的鐵調(diào)素-25轉(zhuǎn)化為更小的多肽（大約20~24個氨基酸），這些多肽活性更低并且在尿液中累積。
近年來，隨著鐵調(diào)節(jié)肽一鐵調(diào)素(hepcidin)的發(fā)現(xiàn)，人們對慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)貧血的病理生理機(jī)制的認(rèn)識顯著提高。在CKD患者中，鐵調(diào)素的清除減少及慢性炎癥狀態(tài)的存在使得血清鐵調(diào)素水平升高。對于鐵調(diào)素多種影響因子及信號通路的研究發(fā)現(xiàn)為治療慢性腎性貧血的藥物研究開辟了新的方向。
檢測原理
鐵調(diào)素檢測試劑采用的是競爭酶聯(lián)免疫法微孔板上包被了能與生物活性鐵調(diào)素-25分子抗原位點特異性結(jié)合的單克隆抗體；樣本中的內(nèi)源性鐵調(diào)素與生物素化鐵調(diào)素競爭結(jié)合包被抗體，溫育后洗去未結(jié)合的部分；加入鏈霉親和素-過氧化物酶復(fù)合物溫育，洗滌；加入底物液，短時間的孵育，發(fā)生顏色變化反應(yīng)；樣本中鐵調(diào)素濃度與顏色的強(qiáng)度成反比。 
鐵調(diào)素檢測試劑組成成分
注意：若有需要可額外訂購稀釋樣本的分析緩沖液
| 名稱 | 數(shù)量 | 成分 | | 微孔板 | 96孔 | 可拆，包被了抗鐵調(diào)素-25抗體（單克?。?/span> | | 標(biāo)準(zhǔn)品（0-5） | 6×0.2ml | 凍干品 濃度：0、2、6.5、25、45、80ng/ml 含無汞防腐劑 | | 高低質(zhì)控 | 2×0.2ml | 凍干品 具體質(zhì)控值及范圍見QC質(zhì)控單 | | 分析緩沖液 | 1×14ml | 即用 含無汞防腐劑 | | 酶復(fù)合物 | 1×14ml | 即用 | | 酶聯(lián)物 | 1×7ml | 即用 含HRP標(biāo)記的鏈霉親和素 | | 洗滌濃縮液 | 1×30ml | 40倍濃縮 | | 底物液 | 1×14ml | 即用TMB | | 終止液 | 1×14ml | 即用0.5M硫酸，避免接觸終止液，會腐蝕和燒傷皮膚 |
實驗所需材料（未提供）
●酶標(biāo)儀（450±10nm） ●校準(zhǔn)的變量移液器 ●吸水紙 ●去離子水或雙蒸水 ●計時器 ●半對數(shù)坐標(biāo)紙或數(shù)據(jù)處理軟件
儲存條件
未開封的試劑在2-8℃下可保存至有效期，不要使用過期的試劑，開封的試劑和微孔板必須貯存于2-8℃，密封袋一旦打開后，應(yīng)立即密封好，開封的試劑盒若按上述方法保存可保持2個月活性。
檢測步驟
每次實驗都應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
1、將實驗所需的板條固定于板架上
2、每孔加100ul的分析緩沖液
3、加20ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本于相應(yīng)的微孔內(nèi)
4、每孔加入50ul的酶復(fù)合物，充分混勻10秒鐘
5、室溫下，溫育60分鐘（300~700rpm）
6、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔加300ul的洗滌液洗板4次（手動）或400ul洗板3次（洗板機(jī)）
7、每孔加100ul的酶聯(lián)物
8、室溫下30分鐘（無需振搖）
9、重復(fù)步驟6
10、每孔加100ul的底物液
11、室溫下溫育20分鐘
12、每孔加100ul的終止液
13、加入終止液10分鐘內(nèi)，在酶標(biāo)儀450±10nm處檢測吸收值
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