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美國(guó)InBios RK-39黑熱病檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：犬黑熱病快速檢測(cè)條

英文名稱(chēng)：Kalazar Detect™ Canine Rapid Test

黑熱病檢測(cè)試劑盒（犬）

【產(chǎn)品規(guī)格】

25T

【預(yù)期用途】

檢測(cè)條可用于犬內(nèi)臟利什曼原蟲(chóng)（VL）抗體的定性檢測(cè)。

【檢測(cè)原理】

該檢測(cè)條的硝化纖維膜在檢測(cè)區(qū)包被了重組的VL抗原，在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。在實(shí)驗(yàn)中，血清樣本與膠體金結(jié)合物（膠體金標(biāo)記的蛋白A）反應(yīng)，而膠體金結(jié)合物預(yù)先包被在檢測(cè)條上。混合物在毛細(xì)管作用下沿著硝化纖維膜移動(dòng)，然后與重組的VL抗原反應(yīng)，并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽(yáng)性結(jié)果，反之則為陰性結(jié)果。

【試劑盒組成成分】

• 檢測(cè)條        25份

• Chase緩沖液一瓶

【儲(chǔ)存條件】

黑熱病檢測(cè)試劑盒（犬），檢測(cè)條應(yīng)保存在20~30℃（室溫）直至有效期。Chase緩沖液也應(yīng)保存在20~30℃。暴露在超過(guò)30℃溫度下（多5天）會(huì)影響檢測(cè)性能，所以應(yīng)盡量避免。檢測(cè)條不應(yīng)冷凍保存，并且從密封袋中取出后應(yīng)在0.5小時(shí)內(nèi)使用，避免受濕度影響。

【樣本要求】

• 該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)使用犬血清，不能使用全血樣本。不能對(duì)樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)?/span>

• 凝血后盡快離心分離血清，以避免溶血現(xiàn)象的產(chǎn)生。

• 應(yīng)在采集血清后盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。血清不能長(zhǎng)時(shí)間存放在室溫下。血清于2~8℃可保存3天，更長(zhǎng)時(shí)間則應(yīng)保存在-20℃以下。

• 實(shí)驗(yàn)前血清平衡至室溫。冷凍的血清必須充分融解。避免反復(fù)凍融。

• 如果血清需要運(yùn)輸，其包裝應(yīng)該符合聯(lián)邦的傳染源運(yùn)輸法規(guī)。

【檢測(cè)步驟】

• 實(shí)驗(yàn)前讓血清平衡至室溫

• 從密封袋或瓶中取出檢測(cè)條

• 在檢測(cè)條箭頭下方加樣區(qū)加入20ul的血清

• 在小試管中，或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中加入2-3滴（150ul）的Chase緩沖液

將檢測(cè)條插入小試管或者微孔中，根據(jù)檢測(cè)條上的箭頭，其末端應(yīng)該朝下

• 在10分鐘內(nèi)讀取結(jié)果。在讀取結(jié)果前，背景的清晰度是十分重要的。尤其是當(dāng)樣本含低滴度的抗利什曼原蟲(chóng)抗體時(shí)，就只有一條很弱的色帶出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)區(qū)（T）。10分鐘后讀取可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果

注意：不要只是加入Chase緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。必須首先加入20ul的血清。

如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒(méi)有觀(guān)察到膠體金的移動(dòng)，可輕輕壓檢測(cè)條上的樣本加入?yún)^(qū)，直到觀(guān)察到膠體金的移動(dòng)。

【結(jié)果解釋】

陽(yáng)性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性則質(zhì)控帶（C）和實(shí)驗(yàn)帶（T）均出現(xiàn)。一條微弱的色帶也為陽(yáng)性結(jié)果。作為解釋指南，實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的顏色強(qiáng)度與抗利什曼原蟲(chóng)抗體濃度相關(guān)。實(shí)驗(yàn)帶為“弱陽(yáng)性"血清樣本，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能為弱陽(yáng)性但可分辨的紅色帶，（“弱陽(yáng)性"樣本則含有對(duì)重組抗原低親和力或者低滴度抗體）。

陰性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)為陰性，則只有質(zhì)控帶出現(xiàn)。沒(méi)有出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)帶

無(wú)效結(jié)果

質(zhì)控帶和檢測(cè)帶都沒(méi)有出現(xiàn)結(jié)果，若只有檢測(cè)帶出現(xiàn)紅色線(xiàn)，而質(zhì)控帶沒(méi)有出現(xiàn)，則也為無(wú)效結(jié)果

建議使用新的檢測(cè)條和新血清再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注意：實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的變化是依賴(lài)于抗利什曼原蟲(chóng)抗體濃度。然而，該實(shí)驗(yàn)不能檢測(cè)抗體的定量值和增加的百分比。

【期望值】

使用該檢測(cè)試劑在26條確認(rèn)患有利氏曼病 的犬上進(jìn)行測(cè)試，26條犬全部檢出（檢出率100%）8條非感染的犬的檢測(cè)顯示，陽(yáng)性率為0。

【注意事項(xiàng)】

• 僅用于體外診斷

• 本測(cè)試只表明有利氏曼抗體存在，并不是診斷該病的標(biāo)準(zhǔn)。

• 如果檢測(cè)結(jié)果為陰性，而臨床癥狀存在，建議采用其他臨床方法進(jìn)行進(jìn)一步測(cè)試，陰性的結(jié)果并不排除利氏曼的感染。

• 不要使用含有甘油或其他粘稠材料的 血清或血將，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度。

• 不要使用過(guò)期產(chǎn)品。

• 處理使用的所有血清和試劑盒，如同含有感染因子一樣。在執(zhí)行所有程序時(shí)，應(yīng)遵守已確定的微生物危害預(yù)防措施，并按照正確處理血清和試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行。

• 執(zhí)行測(cè)定時(shí)，穿上，防護(hù)眼鏡和一次性手套。檢測(cè)完成后*洗手。

• 在測(cè)試期間避免手和眼睛或粘膜之間的所有接觸。

• 處理血清和藥劑的區(qū)域不要進(jìn)食，喝酒或吸煙。

• Chase Buffer含有防腐劑; 避免所有可能的接觸皮膚和粘膜。

利士曼檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品信息