ELISA試劑盒具體的操作方法介紹
ELISA試劑盒的特點(diǎn)是可以一同進(jìn)行許多標(biāo)本的檢測(cè)，并可在特定的比色計(jì)上迅速讀出成果?，F(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測(cè)，包含加樣、洗刷、保溫、比色等進(jìn)程，對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義。下面我們來看看關(guān)于它的操作方法！
操作過程：
1、確認(rèn)本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2、將倍比稀釋的規(guī)范品各0.1ml順次參加一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔參加。
3、酶標(biāo)板加上蓋，37℃反響90分鐘。
4、反響后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對(duì)著吸水紙拍幾下，洗刷2次。
5、將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響60分鐘。
6、0.01MTBS或0.01MPBS洗刷3次，每次浸泡1分鐘左右。
7、將準(zhǔn)備好的工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響30分鐘。
8、按每孔0.1ml順次參加TMB顯色工作液，37℃避光反響，反響過程中，要常常的調(diào)查，當(dāng)肉眼可見規(guī)范品的前3-4孔有顯著的梯度藍(lán)色，后3-4孔不同不顯著時(shí)，即可參加停止液0.1ml/孔。（顯色反響長(zhǎng)不要超越30分鐘）。
9、根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。ELISA試劑盒用戶也能夠使用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍，其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。
注意以下事項(xiàng)：
1.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)；
2.仔細(xì)閱讀闡明書；
4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存；
5.依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量承認(rèn)所需試劑的量；
6.準(zhǔn)備好全部實(shí)驗(yàn)額定所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；按說明書將所用ELISA試劑盒平衡至室溫，制作所需試劑。
