細(xì)胞因子檢測(cè)是由免疫細(xì)胞(如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等)和某些非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等)經(jīng)刺激而合成(一般是免疫細(xì)胞)、分泌的一類生物活性物質(zhì)分泌的蛋白質(zhì),在體內(nèi)廣泛參與免疫調(diào)節(jié)及炎癥反應(yīng)、組織修復(fù)、刺激造血系統(tǒng)、刺激細(xì)胞的增殖與凋亡等重要生理活動(dòng),在抵抗外來病原及維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境平衡中均起重要作用。
細(xì)胞因子檢測(cè)均為蛋白或多肽,具有較強(qiáng)的抗原性。隨著重組細(xì)胞因子的出現(xiàn),可較方便地獲得細(xì)胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體,因此可利用抗原抗體特異性反應(yīng)的特性,用免疫學(xué)技術(shù)定量檢測(cè)細(xì)胞因子。
生物學(xué)測(cè)定法的原理是根據(jù)細(xì)胞因子對(duì)特定的依賴性細(xì)胞株(即靶細(xì)胞)的促增殖作用,以增殖細(xì)胞中的DNA的合成或酶活性為指標(biāo),間接推算出細(xì)胞因子的活性單位,如對(duì)IL-1、IL-2等細(xì)胞因子活性的檢測(cè)。亦可根據(jù)某些細(xì)胞因子對(duì)特定靶細(xì)胞的殺傷效應(yīng)或?qū)Σ《镜囊种谱饔眠M(jìn)行測(cè)定,如對(duì)腫瘤壞死因子及干擾素的生物活性測(cè)定。
分子生物學(xué)測(cè)定法是目前采用的技術(shù)有各種印跡法、斑點(diǎn)雜交、原位雜交和PCR等。通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的基因組成或mRNA量,推算出細(xì)胞因子的合成量。
在實(shí)際應(yīng)用中,可根據(jù)各自的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)室條件進(jìn)行選擇。生物學(xué)檢測(cè)法比較敏感,又可直接測(cè)定生物學(xué)功能,是zui可靠的方法,適用于各種實(shí)驗(yàn)?zāi)康模强蒲胁块Tzui常用的技術(shù),但需要長(zhǎng)期培養(yǎng)依賴性細(xì)胞株,檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng),步驟繁雜,影響因素多,不容易熟練掌握。